抗体应用

1. 检测方法

• Western Blot (WB)：检测OPN蛋白表达水平，区分全长或裂解片段45。

• 免疫组化 (IHC)、免疫荧光 (IF)：定位组织或细胞中的OPN表达（如肿瘤微环境、炎症区域）45。

• ELISA：定量血清、体液或组织中的OPN浓度，用于疾病标志物分析567。

• 流式细胞术：分析免疫细胞（如巨噬细胞、T细胞）表面OPN表达58。

2. 研究领域

• 肿瘤转移：OPN通过整合素激活FAK-Src信号通路，促进肿瘤细胞侵袭与转移459。

• 免疫调控：OPN调节Th1/Th2免疫平衡，增强树突状细胞成熟及T细胞分化5810。

• 骨代谢：参与骨形成与矿化，与骨质疏松、骨关节炎相关101112。

• 发育与疾病：母乳中OPN含量高，支持婴幼儿免疫与认知发育671313。

生物学功能背景

1. 肿瘤转移机制

• OPN通过RGD序列与整合素αvβ3结合，激活FAK-Src信号通路，促进肿瘤细胞迁移459。

• OPN-C端片段与CD44结合，抑制免疫细胞对肿瘤的清除，促进免疫逃逸59。

2. 免疫调节

• OPN增强Th1细胞因子（如IFN-γ）分泌，抑制Th2应答，维持免疫稳态5810。

• 在母乳中，OPN通过肠道屏障保护作用减少婴幼儿发热与炎症反应671313。

3. 骨代谢调控

• OPN促进成骨细胞分化与矿化，抑制破骨细胞活性，参与骨重建101112。

• OPN表达异常与骨质疏松症、关节炎相关，可能通过调节MMPs活性影响骨微结构101112。

使用注意事项

1. 样本处理

• 组织样本：建议使用含蛋白酶抑制剂的裂解液，避免OPN降解145。

• 血清/体液：低温保存（-20°C或-80°C），避免反复冻融145。

2. 实验条件优化

• Western Blot：需还原性条件（如β-巯基乙醇）破坏二硫键，确保抗体识别线性表位45。

• ELISA：优化抗体浓度及孵育时间，避免假阳性（如血清中干扰因子）145。

3. 临床检测参考范围

• 正常值：血清OPN水平因检测方法而异（如ELISA法约10-50 ng/mL）6713。

• 病理变化：肿瘤患者、骨代谢疾病或炎症患者中OPN水平显著升高41011。

供应商建议

• 验证资源：优先选择提供验证数据的抗体（如阳性对照组织、细胞系）459。

• 内毒素控制：若用于细胞培养，需确认抗体内毒素含量（如<1 EU/μg）81113。