靶标蛋白
骨钙素(Osteocalcin, OC):一种由49个氨基酸组成的维生素K依赖性钙结合蛋白,主要由成骨细胞、成牙质细胞分泌,参与骨矿化和钙磷代谢调节1
2
。
结构特征:含3个γ-羧基谷氨酸(Gla)残基,通过与钙离子结合促进骨基质矿化;存在羧化(cOC)和非羧化(uOC)两种形式,后者具有内分泌功能3
4
5
。
抗体类型
多克隆/单克隆:需根据供应商说明确认,常见多克隆抗体用于ELISA或免疫组化,单克隆抗体用于Western Blot或流式细胞术。
反应种属
人、小鼠、大鼠等,部分抗体可交叉反应(如牛骨钙素研究中可能适用)。5
检测方法
Western Blot (WB):检测骨钙素蛋白表达水平,区分羧化与非羧化形式1
2
。
ELISA:定量血清或组织中的骨钙素浓度,用于临床诊断骨代谢疾病(如骨质疏松、甲状旁腺功能亢进)1
2
7
。
免疫组化 (IHC):定位骨组织或细胞中的骨钙素表达,研究骨形成与吸收动态5
8
。
流式细胞术:分析成骨细胞表面骨钙素表达,评估细胞功能状态5
。
研究领域
骨代谢疾病:监测骨质疏松症、骨软化病、骨转移癌等疾病的骨转换速率1
2
3
。
内分泌调控:研究骨钙素对胰岛素分泌、脂肪代谢、肌肉合成的调控作用5
6
。
炎症与肿瘤:探索骨钙素在关节炎、骨肿瘤中的表达变化及机制7
8
。
骨代谢调控
促进骨矿化:羧化骨钙素(cOC)通过结合羟基磷灰石晶体增强骨基质矿化1
5
。
调节骨转换:抑制破骨细胞活性,促进成骨细胞分化,维持骨稳态4
5
。
内分泌功能
非羧化骨钙素(uOC):进入血液循环,作用于胰腺β细胞(促进胰岛素分泌)、脂肪细胞(增强脂联素释放)、大脑(改善认知功能)等5
6
。
疾病关联
骨质疏松症:患者血清骨钙素水平降低,与骨形成减少相关2
4
。
糖尿病:骨钙素水平异常与胰岛素抵抗、脂肪代谢紊乱相关5
6
。
样本处理
血清/血浆:需避免溶血,低温保存(-20°C或-80°C),避免反复冻融1
2
。
组织样本:建议使用含蛋白酶抑制剂的裂解液,避免骨钙素降解。
实验条件
Western Blot:需使用还原性条件(如β-巯基乙醇)破坏二硫键,确保抗体识别线性表位5
7
。
ELISA:优化抗体浓度及孵育时间,避免假阳性(如血清中干扰因子)1
2
。
临床检测参考范围
正常值:RIA法4-10 ng/L,ELISA法4-7 ng/L1
2
。
病理变化:骨转换加快(如甲状旁腺功能亢进)时升高,肝病、糖尿病时降低1
2
3
。
验证资源:优先选择提供验证数据的抗体(如阳性对照组织、细胞系)5
。
内毒素控制:若用于细胞培养,需确认抗体内毒素含量(如<1 EU/μg)7
9
。