靶点与功能:NK-1.1(也称为CD161b/CD161c、KLRB1、NKR-P1A/Ly-55)是小鼠NK细胞和部分NK-T细胞表面的标志物,参与NK细胞活化、IFN-γ分泌及细胞毒性颗粒释放,且仅在特定小鼠品系(如C57BL/6、FVB/N、NZB)中表达。
克隆号与应用:常见克隆号为 PK136,适用于流式细胞术(FCM)和体内NK细胞耗竭实验。若为APC标记,通常用于流式分析中多色标记。
APC荧光特性:别藻蓝蛋白(APC)发射波长为660 nm,适用于配备红色激光(633 nm或635 nm)的流式细胞仪,需搭配相应滤光片(如670/25 nm)。
抗体选择建议:
品系兼容性:确保抗体适用于实验小鼠品系(如C57BL/6)。
同型对照:需使用同源IgG2a同型对照(如InVivoMAb的IgG2a对照)以排除非特异性结合。
封闭步骤:流式实验中需用封闭剂(如正常血清)减少非特异性结合。
单细胞悬液制备:若检测组织样本(如脾脏、淋巴结),需先研磨并离心获得单细胞悬液,避免细胞团块干扰流式结果。
电压调节:根据细胞大小调整光电倍增管电压,确保目标细胞群清晰显示。
补偿调节:多色标记时需设置单阳对照管,补偿荧光溢出(如APC与FITC的交叉信号)。